01 细胞转染概述及应用

细胞转染是一种生物医学技术，旨在将外源基因（如DNA或RNA）通过化学、生物或物理方法引入真核细胞。这项技术对生物医学研究至关重要，提供了多种应用，包括：

• 研究基因功能：通过转染特定目的基因，观察在高表达状态下对细胞功能的影响，或使用siRNA和shRNA技术抑制目的基因的表达，研究基因缺失对细胞功能的影响。
• 蛋白质表达与生产：转染编码目标蛋白的基因以进行蛋白质的表达和纯化，或通过标记荧光蛋白研究目标蛋白在细胞内的分布与定位。
• 细胞工程：通过转染并筛选，获得能够稳定表达外源基因的细胞系，进而建立稳定转基因细胞株。
• 药物筛选与毒性测试：转染特定基因以验证药物靶点的有效性，并通过高通量筛选寻找潜在药物。
• 基因治疗：导入或修复基因，治疗遗传疾病，同时可转染编码抗原的基因以进行疫苗研发。

02 细胞转染分类

Part1 根据外源核酸在宿主细胞中的存在时间，细胞转染分为瞬转和稳转：

• 瞬转：外源基因能够表达，但不会整合到宿主细胞基因组中，随细胞分裂逐渐丢失。
• 稳转：外源基因可整合进细胞基因组中，伴随细胞分裂持续表达，确保转染细胞的子代也能表达外源基因。

二者区别包括目的、稳定性、转染方法、筛选过程、质粒要求及表达时效的不同。例如，瞬转适合短时间获得高水平基因表达，而稳转则为获取稳定表达细胞株的理想选择。稳转的方法多依赖于转染后筛选目标基因成功整合的细胞。

Part2 根据方法，细胞转染分为物理介导法、化学介导法及生物介导法：

• 物理介导法：直接通过电穿孔法或显微注射法将外源核酸导入细胞，通常不需要化学物质，效率高但对细胞损伤较大，存活率低。
• 化学介导法：利用化学试剂如PEI和脂质体改变细胞膜性质，从而实现基因转移。此法操作简便，但往往不能长期稳定表达外源基因。
• 生物介导法：通过病毒载体，如慢病毒或腺病毒，将外源基因有效导入细胞，能够实现长期稳定表达。然而，操作较为复杂，实验周期相对较长。

综上所述，细胞转染方法多样化，选择恰当的转染方式依赖于实验需求、实验室条件及细胞类型等因素。目前，许多实验室偏向于使用化学介导的脂质体转染法及生物介导的慢病毒转染法。脂质体转染虽操作简单，但在某些细胞系中的转染效率较低。而尊龙凯时人生就博提供的慢病毒转染则拥有稳定表达和广泛宿主范围的优势，对于非分裂的原代细胞和干细胞等具有较高的转染效率，并可用于体内外实验。

我们尊龙凯时人生就博公司专注于对常用细胞系及原代细胞进行慢病毒转染，包括转染绿色荧光蛋白（ZsGreen）或红色荧光蛋白（mCherry、RFP）、化学发光LUC及SV40永生化等，提供近40种的稳定转基因细胞系服务。

✔慢病毒转染服务：

• SNTS-L001：获得GFP稳定表达的细胞，实验周期3-4周。
• SNTS-L002：获得RFP稳定表达的细胞，实验周期3-4周。
• SNTS-L003：获得mCherry稳定表达的细胞，实验周期3-4周。
• SNTS-L004：获得LUC稳定表达的细胞，实验周期3-4周。
• SNTS-L005：获得SV40永生化细胞（以原代细胞为主），实验周期6-8周。